JBCS

INTRODUÇÃO

A extração em fase sólida (SPE, do inglês solid phase extraction) tem sido uma das principais técnicas de extração de espécies químicas presentes nos mais diversos tipos de amostras líquidas.^1-6 A alta capacidade de concentrar os solutos nos extratos, a facilidade de automação e a redução do consumo de solventes orgânicos são algumas das vantagens conhecidas da SPE frente a outras técnicas de extração.^7-11 No entanto, a contínua e crescente utilização da SPE nas últimas décadas têm sido associada principalmente ao desenvolvimento de novos sorventes, como nanotubos de carbono,^9,12,13 líquidos iônicos,^10,14-16 polímeros impressos molecularmente (MIP, do inglês molecularly-imprinted polymer),^8,11,17,18 etc.^19-21, levando a uma melhora na especificidade de interação com o soluto alvo e ampliando cada vez mais o campo de aplicação da técnica.

Apesar dos avanços alcançados com estes novos sorventes, os principais materiais empregados em processos de extração em fase sólida ainda são baseados em reagentes organossilanos, como C₈ e C₁₈, quimicamente ligados sobre a sílica,^19,22-24 pois apresentam seletividade e eficiência superiores para os mais diversos tipos de solutos quando comparados a outros materiais.^24-26 No entanto, devido à alta hidrofobicidade destes sorventes, algumas substâncias mais hidrofóbicas podem ficar retidas excessivamente, requerendo um volume maior de solventes orgânicos para alcançar maiores porcentagens de recuperação.^24,27 Além disso, sorventes baseados em organossilanos de cadeia carbônica longa apresentam mecanismos mistos de retenção: (i) partição entre solutos hidrofóbicos e a cadeia carbônica e (ii) forte adsorção de solutos polares em grupos silanóis ativos (Si-OH) da superfície da sílica que não foram modificados no processo de organossilanização, devido ao impedimento estérico causado pelo grande volume do modificador (C₈ ou C₁₈).^28-29 Sorventes com menores comprimentos de cadeia carbônica, apesar de requererem menores volumes de solventes orgânicos para recuperação dos solutos, não apresentam seletividade adequada, comprometendo a eficiência de extração.^19,23,30

A preparação de sorventes com seletividades finamente ajustadas e melhor recobrimento do suporte de sílica pode ser alcançada com a imobilização de polímeros orgânicos pré-sintetizados. Trata-se de um método simples, rápido e de baixo custo, que apresenta boa reprodutibilidade e permite completo controle da temperatura e das demais condições de preparo.^31-37 A ampla disponibilidade comercial de polímeros de baixo custo e de características diversas permite a preparação de um sorvente com seletividade adequada a um determinado problema analítico. Neste contexto, este trabalho buscou a preparação de um novo sorvente para SPE de hidrofobicidade reduzida baseado na imobilização térmica de um polissiloxano, o poli (dimetilsiloxano-co-alquilmetilsiloxano) - PDAS, sobre a superfície de partículas de sílica. O PDAS apresenta em sua unidade monomérica uma cadeia carbônica longa (C₁₈ ou C₁₆) intercalada com uma cadeia carbônica curta (C₁), resultando em uma menor hidrofobicidade, porém com seletividade similar à de fases sólidas C₁₈ convencionais. As características físico-químicas e de retenção desse novo sorvente foram avaliadas por diferentes técnicas espectroscópicas e por um estudo da capacidade de sorção, bem como da possibilidade de reutilização dos cartuchos recheados com esse sorvente.

PARTE EXPERIMENTAL

Reagentes

O sorvente foi preparado com partículas irregulares de sílica gel 60 (Sigma-Aldrich, Saint Louis, EUA), com diâmetro de 40 a 63 µm e o polímero poli(dimetilsiloxano-co-alquilmetilsiloxano), PDAS, foi obtido da Aldrich. Solventes como tolueno grau espectroscópico (Vetec, São Paulo, Brasil), álcool metílico grau cromatográfico (Tedia, Rio de Janeiro, Brasil) e água ultrapura, com condutividade de 18,2 MΩ cm obtida pelo sistema MegaPurity (Billerica, EUA), foram empregados na preparação do sorvente sendo previamente filtrados em membranas de PTFE de 0,22 µm. Os compostos testes, cloridrato de propranolol (99%), atenolol (98%) e tartarato de metoprolol (98%) foram obtidos da Medley (Campinas, Brasil).

Preparação dos cartuchos de extração em fase sólida

O suporte de sílica foi previamente ativado a 140 ºC por 4 h. Lotes de sorventes foram preparados a partir da mistura de sílica, solução de PDAS a 30% (m/v) e tolueno na proporção de 1:1:4 (m/v/v). Inicialmente a sílica foi adicionada a uma solução de PDAS em tolueno e deixada sob agitação branda por 3 h à temperatura ambiente (~28 ºC). Logo após, o sorvente foi deixado sob repouso para a evaporação completa do solvente à temperatura ambiente e sem agitação.

O material sorvido e seco, Si(PDAS), foi submetido a uma etapa de imobilização térmica em estufa a 110 ºC por 12 h. Os resíduos do PDAS, polímero não imobilizado na sílica, foram removidos pela lavagem sequencial com pequenas porções de tolueno, metanol e metanol:água (1:1, v/v).

Seringas de polipropileno de 3 mL foram preenchidas com suspensões de 500 mg (± 10 mg) do sorvente Si(PDAS) em mistura metanol:água (1:1, v/v) e os recheios compactados nos cartuchos por centrifugação a 2500 rpm por 5 min. Os cartuchos foram constituídos de seringas de polipropileno de 3 mL, que podem ser adquiridos em quaisquer redes de drogarias e/ou farmácias. O sorvente foi retido no interior da seringa por filtros de politetrafluoretileno (PTFE).

Preparação dos cartuchos de extração em fase sólida

As características físico-químicas do sorvente foram avaliadas por medidas espectroscópicas no infravermelho (instrumento Jasco FTIR 4100, Tóquio, Japão), por ressonância magnética nuclear de ²⁹Si (espectrômetro Varian INOVA 500 MHz, Palo Alto, EUA) e análise elementar (analisador PerkinElmer CHN-2400, Shelton, EUA).

Avaliação da capacidade de retenção do sorvente Si(PDAS)

Para avaliar a capacidade de retenção do sorvente Si(PDAS), inicialmente foi determinado o tempo de equilíbrio para a retenção de um soluto teste na fase sólida. Para isso, uma solução aquosa a 25 µg mL^-1 de propranolol, soluto teste, foi deixada em contato e sob agitação constante com porções de 100 (± 3) mg do sorvente, por diferentes tempos 0,5; 1; 2; 5; 10; 15; 20; 25; 30; 35; 40; 45; 50; 55 e 60 min. à temperatura constante de 28 ºC. Após o período de contato, a solução foi filtrada por filtros de nylon com 33 mm de diâmetro e 0,45 µm de poros. O teor de propranolol retido na fase sólida foi determinado pela medida de absorbância do filtrado em 290 nm, utilizando a espectrometria de absorção molecular UV/vis (espectrofotômetro PerkinElmer Lambda 25 UV/vis, Shelton, EUA). Posteriormente, soluções do propranolol sob diferentes concentrações: 25; 50; 75; 100; 125; 150 µg mL^-1 foram deixadas em contato por 5 min sob agitação intensa com 100 (± 3) mg de Si(PDAS) à temperatura constante de 28 ºC. Em seguida, as suspensões foram filtradas e os filtrados límpidos foram analisados por espectroscopia de absorção molecular no UV a 290 nm. O mesmo procedimento foi empregado para um sorvente comercial à base de C₁₈. Todos os experimentos foram realizados em triplicata.

Avaliação do efeito carry over dos cartuchos SPE lab made

Para avaliar a possibilidade de reutilização dos cartuchos, 50 mL de amostras de água de torneira fortificados com uma mistura de atenolol, metoprolol e propranolol a 1,0 µg mL^-1 de cada fármaco foram eluídos pelos cartuchos contendo o sorvente Si(PDAS), previamente ativados com a passagem de água ultrapura. Para a limpeza dos extratos, 5 mL de hexano foram eluídos pelos cartuchos. Os analitos foram recuperados com 1 mL de metanol. Os cartuchos foram então reutilizados após a passagem de 10 mL de metanol, substituindo a amostra de água fortificada por água ultrapura sem a presença dos analitos.

Os extratos dos fármacos obtidos na primeira e segunda extração foram analisados por cromatografia gasosa com detecção por ionização em chama. Foi utilizado um cromatógrafo a gás Thermo Focus GC (Waltham, EUA) acoplado a um injetor manual split/splitless a 250 ºC, com divisão de fluxo de 1:10; coluna capilar OV-5 de 30 m de comprimento, 0,25 mm de diâmetro interno e 0,25 µm de espessura de filme de poli(5%-difenil-95%-dimetilsiloxano) e detector por ionização em chama a 300 ºC. O gás de arraste empregado foi o N₂ na vazão de 2 mL min^-1. A programação de temperatura do forno de coluna foi de temperatura inicial de 150 ºC por 2,33 min, seguida de aquecimento de 30 ºC min^-1 até 290 ºC. Volume de injeção de 1,0 µL.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

O PDAS é um polissiloxano que apresenta uma cadeia monomérica alternada pelos grupamentos metila e octadecila ou hexadecila (Figura 1). O objetivo do uso deste polímero é produzir uma camada menos hidrofóbica, porém com seletividade similar a de sorventes C₁₈ convencionais. A utilização da imobilização polimérica sobre o suporte inorgânico é uma alternativa simples e de baixo custo para a preparação de sorventes, viabilizando a redução de custos dos cartuchos SPE. O material preparado foi submetido à caracterização físico-química para determinar como e quanto do PDAS foi imobilizado no suporte de sílica.

Figura 1. Estrutura química do polímero poli(dimetil-co-alquilmetilsiloxano). R refere-se aos grupos C₁₈H₃₇ ou C₁₆H₃₃ e n refere-se ao número de unidades monoméricas

A deposição do polímero PDAS na superfície da sílica foi confirmada por meio das análises por espectroscopia de absorção no infravermelho. A Figura 2 apresenta os espectros IV obtidos para o suporte de sílica e para o sorvente Si(PDAS) imobilizado termicamente. Os sinais em 2850 cm^-1 e 2930 cm^-1, atribuídos aos estiramentos C-H dos grupos CH₂ e CH₃, respectivamente, são provenientes do PDAS que confirmam sua deposição sobre a sílica. A camada polimérica é depositada normalmente na forma de "plugs" ou gotas,³⁵ deixando parte da superfície da sílica exposta ao contato com a amostra. A presença do sinal em 975 cm^-1 atribuído à vibração de grupos hidroxilas ligados ao átomo de silício (Si-OH) no espectro de Si(PDAS) indica que a superfície da sílica não foi completamente recoberta pela camada polimérica, permanecendo alguns grupos silanóis descobertos. Apesar do recobrimento incompleto, normalmente a quantidade de grupos residuais expostos é inferior ao obtido pela reação com reagentes organossilanos.^31,35

Figura 2. Espectros de infravermelho do a) suporte de sílica e b) do sorvente Si(PDAS)

A ressonância magnética nuclear de ²⁹Si foi utilizada a fim de determinar as espécies químicas de silício presentes no sorvente Si(PDAS) avaliando, desta forma, o tipo de ligação formada entre o polímero e a superfície da sílica. Os espectros de RMN de ²⁹Si do suporte de sílica e do sorvente Si(PDAS), apresentados na Figura 3, indicam apenas sinais devido às espécies de silício da sílica. Os sinais detectados em -92 ppm, -101 ppm e -110 ppm, são atribuídos à presença das espécies de silanóis geminais, Si(OH)₂ (Q²); silanóis livres e vicinais, Si-OH (Q³), e; ligações siloxano, Si-O-Si (Q⁴), respectivamente. A ausência do sinal característico das espécies de silício ligadas a átomos de carbono provenientes dos polímeros na região de -40 a -70 ppm³⁸ indica que o polímero encontra-se apenas adsorvido, recobrindo fisicamente a superfície da sílica, sem a promoção da ligação química entre o polímero e a sílica.

Figura 3. Espectros de RMN de ²⁹Si do a) suporte de sílica e do b) sorvente Si(PDAS)

A ausência da ligação química entre o PDAS e a sílica não implica em um sorvente de qualidade inferior aos sorventes quimicamente ligados. Devido à inércia química do PDAS, evitando a sua solubilização nos eluentes orgânicos e aquosos, e ao seu recobrimento mais eficiente da superfície do suporte, o contato de substâncias adsorventes à sílica pode ser minimizado, promovendo majoritariamente interações hidrofóbicas entre o sorvente e os analitos.

O teor de carbono da fase sólida Si(PDAS) foi determinado por análise elementar, sendo possível, dessa forma, inferir sobre a quantidade de polímero imobilizado sobre a superfície do suporte. Foi realizado também um estudo para verificar o efeito da temperatura de imobilização do polímero PDAS na sílica sob temperaturas de 90, 100, 110 e 120 ºC por 12 h. Os resultados obtidos dessas medidas estão apresentados na Tabela 1. A massa de PDAS imobilizada na sílica foi determinada pela expressão % PDAS = [%C/(65 - %C)] × 100, em que 65 refere-se a quantidade percentual de carbono por unidade monomérica do polímero.³⁹

A quantidade de polímero depositada na sílica, observada pelo teor de carbono da fase sólida na Tabela 1, permaneceu praticamente constante com o aumento da temperatura de imobilização, indicando que a faixa de temperatura de imobilização estudada não afeta de forma significativa a deposição do polímero. Dessa forma, qualquer temperatura entre 100 e 120 ºC poderia ser empregada na imobilização do PDAS para a preparação do sorvente, no entanto, optou-se pela temperatura intermediária de 110 ºC para a preparação do Si(PDAS) nesse trabalho. O teor de carbono obtido para o sorvente Si(PDAS) é cerca de 2/3 do teor encontrado em fases sólidas comerciais baseadas em C₁₈ quimicamente ligado a sílica.

Capacidade de retenção do sorvente Si(PDAS)

A capacidade e o modelo de retenção no sorvente Si(PDAS) foi avaliado a partir do estudo de isoterma de sorção. O soluto testado foi o fármaco propranolol, pois este interage com a fase sólida tanto por mecanismos hidrofóbicos com a camada polimérica como por mecanismos hidrofílicos com o suporte de sílica. Inicialmente, o tempo necessário para o estabelecimento do equilíbrio entre o soluto e a fase sólida Si(PDAS) no processo de retenção foi determinado, sendo de 5 minutos. A partir desse tempo a quantidade de soluto retida na fase sólida não sofreu variação significativa.

A sorção de propranolol no Si(PDAS) foi estudada pelo contato entre o sorvente e o soluto sob diferentes concentrações, 25 a 150 µg mL^-1, mantendo constantes o período de agitação (5 min), a temperatura (28 ºC) e a quantidade de sorvente (100 mg). Após o tempo de contato, as soluções foram filtradas e suas absorbâncias medidas espectrofotometricamente a 290 nm. Em seguida, calculou-se a concentração de equilíbrio (C_e) do propranolol na solução, concentração de propranolol que não foi retida na fase sólida, e a quantidade de propranolol que ficou sorvida (q_e) no sorvente Si(PDAS), de acordo com as diferentes concentrações de propranolol. O modelo e a capacidade máxima de retenção do sorvente Si(PDAS) foram determinados por meio do gráfico apresentado na Figura 4a, que relaciona estas quantidades.

Figura 4. Isotermas de sorção a 28 ºC do propranolol a) no sorvente Si(PDAS) e b) no sorvente SiC₁₈ quimicamente ligada

O comportamento obtido para a retenção do propranolol no sorvente Si(PDAS) segue o modelo de isoterma BET (Brunauer, Emmett, e Teller),⁴⁰ conforme pode ser observado na Figura 4a. Por este modelo, sugere-se que o soluto seja sorvido na forma de multicamadas na fase sólida, e cada camada possui uma capacidade de reter 6,6 mg (Q⁰) de soluto por grama da fase sólida.⁴⁰

O mesmo teste foi realizado com cartuchos comerciais C₁₈, obtendo comportamento similar. No entanto, cada camada possui uma capacidade de retenção de 12,7 mg de soluto por grama de SiC₁₈, Figura 4b. Esta maior capacidade de retenção dos sorventes comerciais está relacionada à maior densidade de grupamentos C₁₈ se comparados ao sorvente Si(PDAS), que também apresenta grupos C₁₈. Este fato indica que o sorvente Si(PDAS) possui menor hidrofobicidade e, portanto, menor capacidade de retenção de solutos hidrofóbicos que sorventes a base de C₁₈. Este fato pode ser desejável durante o processo de eluição dos solutos no processo SPE, uma vez que um menor volume de solvente orgânico será necessário para a sua recuperação da camada polimérica de PDAS.

O comportamento não ideal dos dados na Figura 4b pode estar associado à retenção do propranolol por mecanismos hidrofílicos nos grupos ativos residuais da fase sólida comercial, que não foram modificados quimicamente pelas moléculas de C₁₈.^28,29 Desta forma o propranolol, além de ficar retido na camada líquida de C₁₈ por mecanismos de partição, também ficou retido nos grupos silanóis residuais da superfície do suporte por mecanismos de adsorção.

Avaliação do efeito carry over no sorvente Si(PDAS)

A possibilidade de reutilização dos cartuchos SPE recheados com Si(PDAS) foi avaliada pelo efeito de memória no sorvente. Uma amostra de água de torneira fortificada com 1,0 µg mL^-1 de atenolol, propranolol e metoprolol foi submetida à extração em fase sólida empregando o cartucho recheado com Si(PDAS), os fármacos foram recuperados e pré-concentrados em metanol e o extrato analisado por cromatografia gasosa. O cromatograma obtido está apresentado na Figura 5a.

Figura 5. Cromatograma dos extratos de amostras de água obtidos na a) primeira eluição e na b) segunda eluição empregando o mesmo sorvente Si(PDAS). Identificação dos picos: 1- metoprolol, 2- propranolol, 3- atenolol e *- impurezas

As recuperações dos fármacos foram alcançadas pelo método de extração em fase sólida, empregando os cartuchos recheados com Si(PDAS) foi de 93,7%; 93,7% e 46,9% para o metoprolol, propranolol e atenolol, respectivamente. A recuperação menor do atenolol está associado à sua maior polaridade se comparado aos demais fármacos, não ficando eficientemente retido na fase sólida Si(PDAS). Aos cartuchos previamente utilizados foram passados 10 mL de metanol para remoção dos possíveis resíduos dos fármacos que não foram recuperados da fase sólida. Logo após, uma amostra de água ultrapura, sem a presença de qualquer traço dos fármacos, foi submetida ao processo de extração em fase sólida, empregando os cartuchos recém-utilizados, e os extratos analisados por CG. A Figura 5b apresenta o cromatograma de um dos extratos obtidos da reutilização do Si(PDAS). Como observado, não há qualquer pico significativo nos tempos de retenção do metoprolol (t_R = 4,54 min), propranolol (t_R = 5,00 min) ou atenolol (t_R = 5,83 min). Este é um indicativo de que o cartucho recheado com o sorvente Si(PDAS) imobilizado termicamente não apresenta de forma significativa o efeito carry over, isto é, o sorvente não acumula resíduos de solutos provenientes de extrações prévias. Possivelmente, o recobrimento da superfície do suporte de sílica é mais eficiente com a imobilização de polímero que em fases sólidas quimicamente ligadas, em que uma elevada quantidade de grupos ativos superficiais da sílica permanece sem reagir no processo de organossilanização. Isto faz com que compostos contendo grupos polares interajam com grupos residuais da superfície do suporte de sílica mais fortemente, sendo liberados de forma contínua e lenta ao longo das extrações causando o efeito de memória nesses sorventes.

CONCLUSÃO

De acordo com os resultados obtidos neste trabalho, a fase sólida baseada na imobilização térmica do poli(dimetil-co-alquilmetilsiloxano) sobre sílica apresenta como principal característica a menor hidrofobicidade se comparada com sorventes C₁₈ convencionais. O sorvente Si(PDAS) possui uma camada polimérica adsorvida fisicamente sobre a superfície da sílica de forma incompleta, porém com grau de proteção maior que sorventes quimicamente ligados. A principal vantagem de um sorvente de menor hidrofobicidade é a recuperação de analitos mais hidrofóbicos com menor quantidade de solventes orgânicos, aumentando o fator de concentração do analito no extrato. Além de eficiente e robusta, a preparação de fases sólidas pelo método de imobilização polimérica é simples e economicamente viável, uma vez que o método utiliza reagentes e materiais de baixo custo e de fácil acesso. A reutilização do sorvente Si(PDAS) no processo de extração em fase sólida também se mostrou viável, uma vez que os cartuchos não apresentaram efeito carry over. Portanto, o novo sorvente Si(PDAS) apresenta potencial para ser empregado em processos de extração em fase sólida, principalmente quando o objetivo é a análise de compostos altamente hidrofóbicos, os quais são fortemente retidos em sorventes SPE convencionais.

AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem a Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) e à Rede Mineira de Química (RQ-MG) pelo auxílio financeiro. Os autores agradecem também as professoras C. H. Collins e I. C. S. F. Jardim pela colaboração nas caracterizações do sorvente.

REFERÊNCIAS

1. Chimalakonda, K. C.; Moran, C. L.; Kennedy, P. D.; Endres, G. W.; Uzieblo, A.; Dobrowolski, P. J.; Fifer, E. K.; Lapoint, J.; Nelson, L. S.; Hoffman, R. S.; James, L. P.; Radominska-Pandya, A.; Moran, J. H.; Anal. Chem.2011, 83, 6381. DOI: http://dx.doi.org/10.1021/ac201377m PMID: 21740038

2. Baker, D. R.; Hordern, B. K.; J. Chromatogr. A2011, 1218, 1620. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2011.01.060 PMID: 21334631

3. Huang, K. J.; Jing, Q. S.; Wei, C. Y.; Wu, Y. Y.; Spectrochim. Acta, Part A2011, 79, 1860. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.saa.2011.05.076

4. Lee, T. P.; Saad, B.; Khayoon, W. S.; Salleh, B.; Talanta2012, 88, 129. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2011.10.021 PMID: 22265478

5. Castro, A. L.; Tarelho, S.; Silvestre, A.; Teixeira, H. M.; Journal of Forensic and Legal Medicine2012, 19, 77. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.jflm.2011.12.006 PMID: 22281215

6. Giovannoli, C.; Anfossi, L.; Biagioli, F.; Passini, C.; Baggiani, C.; Microchim. Acta2013, 180, 1371. DOI: http://dx.doi.org/10.1007/s00604-013-0980-0

7. Chen, L.; Wang, H.; Zeng, Q.; Xu, Y.; Sun, L.; Xu, H.; Ding, L.; J. Chromatogr. Sci.2009, 47, 614. DOI: http://dx.doi.org/10.1093/chromsci/47.8.614 PMID: 19772737

8. Augusto, F.; Carasek, E.; Silva, R. G. C.; Rivellino, S. R.; Batista, A. D.; Martendal, E.; J. Chromatogr. A2010, 1217, 2533. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2009.12.033 PMID: 20035942

9. Pérez, L. M. R.; Herrera, A. V. H.; Borges, J. H.; Delgado, M. A. R.; J. Chromatogr. A2010, 1217, 2618. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2009.10.083

10. Vidal, L.; Riekkola, M. L.; Canals, A.; Anal. Chim. Acta2012, 715, 19. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.aca.2011.11.050 PMID: 22244164

11. Augusto, F.; Hantao, L. W.; Mogollón, N. G. S.; Braga, S. C. G. N.; TrAC, Trends Anal. Chem.2013, 43, 14. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.trac.2012.08.012

12. Duran, A.; Tuzen, M.; Soylak, M. J. Hazard. Mater.2009, 169, 466. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.jhazmat.2009.03.119 PMID: 19398267

13. Stafiej, A.; Pyrzynska, K.; Microchem. J.2008, 89, 29. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.microc.2007.11.001

14. Fontanals, N.; Ronka, S.; Borrull, F.; Trochimczuk, A. W.; Marcé, R. M.; Talanta2009, 80, 250. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2009.06.068 PMID: 19782223

15. Vidal, L.; Parshintsev, J.; Hartonen, K.; Canals, A.; Riekkola, M. L.; J. Chromatogr. A2012, 1226, 2. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2011.08.075 PMID: 21925663

16. Fontanals, N.; Borrull, F.; Marcé, R. M.; TrAC, Trends Anal. Chem.2012, 41, 15. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.trac.2012.08.010

17. Yang, H. H.; Zhou, W. H.; Guo, X. C.; Chen, F. R.; Zhao, H. Q.; Lin, L. M.; Wang, X. R.; Talanta2009, 80, 821. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2009.07.067 PMID: 19836558

18. Ambrosini, S.; Shinde, S.; De Lorenzi, E.; Sellergren, B.; Analyst2012, 137, 249. DOI: http://dx.doi.org/10.1039/C1AN15606C PMID: 22034618

19. Li, Y.; Xie, X.; Lee, M. L.; Chen, J.; J. Chromatogr. A2011, 1218, 8608. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2011.09.070 PMID: 22030157

20. Qureshi, M. N.; Stecher, G.; Huck, C.; Bonn, G. K.; Cent. Eur. J. Chem.2011, 9, 206. DOI: http://dx.doi.org/10.2478/s11532-011-0006-x

21. Du, F.; Ruan, G.; Liang, S.; Xie, F.; Liu, H.; Anal. Bioanal. Chem.2012, 404, 489. DOI: http://dx.doi.org/10.1007/s00216-012-6131-3 PMID: 22684864

22. Benavente, F.; Casanellas, S. M.; Barbosa, J.; Sanz-Nebot, V.; J. Sep. Sci.2010, 33, 1294. PMID: 20187028

23. Ramautar, R.; de Jong, G. J.; Somsen, G. W.; Electrophoresis2012, 33, 243. DOI: http://dx.doi.org/10.1002/elps.201100453 PMID: 22125291

24. Magiera, S.; Hejniak, J.; Baranowski, J.; J. Chromatogr. B2014, 958, 22. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.jchromb.2014.03.014

25. Zygler, A.; Wasik, A.; Namiesnik, J.; Talanta2010, 82, 1742. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2010.07.070 PMID: 20875571

26. El-Sheikh, A. H.; Sweileh, J. A.; Al-Degs, Y. S.; Insisi, A. A.; Al-Rabady, N.; Talanta2008, 74, 1675. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2007.09.005 PMID: 18371835

27. Salam, M. A.; Burk, R.; Anal. Bioanal. Chem.2008, 390, 2159. DOI: http://dx.doi.org/10.1007/s00216-008-1960-9 PMID: 18335210

28. Engelhardt, H.; Blay, Ch.; Saar, J.; Chromatographia2005, 62, S19. DOI: http://dx.doi.org/10.1365/s10337-005-0573-0

29. Lahaie, M.; Mess, J. N.; Furtado, M.; Garofolo, F.; Bioanalysis2010, 2, 1011. DOI: http://dx.doi.org/10.4155/bio.10.65 PMID: 21083205

30. Sun, H.; Wang, L.; Ai, L.; Liang, S.; Wu, H.; Food Control2010, 21, 686. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.foodcont.2009.10.008

31. Melo, L. F. C.; Collins, C. H.; Jardim, I. C. S. F.; J. Chromatogr. A2005, 1073, 75. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2004.09.043 PMID: 15909507

32. Vigna, C. R. M.; Morais, L. S. R.; Collins, C. H.; Jardim, I. C. S. F.; J. Chromatogr. A2006, 1114, 211. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2006.03.034 PMID: 16600261

33. Queiroz, S. C. N.; Melo, L. F. C.; Jardim, I. C. S. F.; Quim. Nova2006, 29, 637. DOI: http://dx.doi.org/10.1590/S0100-40422006000400002

34. Faria, A. M.; Maldaner, L.; Santana, C. C.; Jardim, I. C. S. F.; Collins, C. H.; Anal. Chim. Acta2007, 582, 34. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.aca.2006.08.046 PMID: 17386471

35. Faria, A. M.; Collins, C. H.; Jardim, I. C. S. F.; J. Braz. Chem. Soc.2009, 20, 1385. DOI: http://dx.doi.org/10.1590/S0103-50532009000800002

36. Jardim, I. C. S. F.; Scientia Chromatographica2010, 2, 13.

37. Maldaner, L.; Jardim, I. C. S. F.; Talanta2012, 100, 38. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2012.08.006 PMID: 23141309

38. Bachmann, S.; Melo, L. F. C.; Silva, R. B.; Anazawa, T. A.; Jardim, I. C. S. F.; Collins, K. E.; Collins, C. H.; Albert, K.; Chem. Mater.2001, 13, 1874. DOI: http://dx.doi.org/10.1021/cm001179f

39. Faria, A. M.; Marcos, C. A.; Vigna, C. R. M.; Collins, C. H.; Quim. Nova2008, 31, 417. DOI: http://dx.doi.org/10.1590/S0100-40422008000200040

40. Rouquerol, J.; Rouquerol, F.; Llewellyn, P.; Maurin, G.; Sing, K. S. W.; Adsorption by Powders and Porous Solids: Principles, Methodology and Applications, Academic Press: Oxford, 2013.