JBCS

INTRODUÇÃO

O melhor caminho para avaliar as condições ambientais de um ecossistema costeiro é através da análise dos seus sedimentos, uma vez que os poluentes tendem a se associar às partículas finas deste compartimento geoquímico.^1,2 A matéria orgânica (MO), por afinidade química com oligoelementos e poluentes orgânicos, tende a se concentrar nas frações de argila e silte do sedimento.³ Portanto, o conhecimento sobre a composição química dos sedimentos é de grande relevância pela possibilidade de determinar a proveniência, a distribuição, a extensão, e também os possíveis riscos de contaminação.^1,4,5

Os principais métodos para avaliação dos sedimentos envolvem a análise das suas características geoquímicas como granulometria, composição biogênica (carbono orgânico, nitrogênio e hidrogênio) e as concentrações de possíveis contaminantes. Os métodos convencionais recomendados para a avaliação desses parâmetros (e.g.: determinação de oligoelementos por fonte de plasma indutivamente acoplado - ICP), em geral, são procedimentos dispendiosos e/ou trabalhosos para a caracterização dos sedimentos.^1,6 Por outro lado, técnicas espectroscópicas modernas são poderosas ferramentas para a investigação da camada superficial do sedimento. Essas técnicas apresentam vantagens sobre os outros métodos, pois são mais simples, baratas, exigem uma pequena quantidade de amostra, o tempo de análise é curto e o pré-tratamento da amostra é rápido e fácil.^7-9

A análise espectroscópica de infravermelho com transformada de Fourier por refletância difusa (DRIFT) é um método clássico para a caracterização da estrutura molecular da matéria orgânica e inorgânica.^10,11 O princípio básico desta técnica é que as vibrações das ligações químicas absorvem energia infravermelha em números de onda específicos.¹² Deste modo, as localizações espectrais da absorção de infravermelho são indicativas de ligações em grupos funcionais (e.g.: alifático, amídico, aromático e carboxílico) que podem fornecer informações importantes sobre a MO.^13-15 Portanto, a espectroscopia no infravermelho é um método amplamente utilizado para elucidar a estrutura molecular da matéria orgânica em sedimentos costeiros.^2,10,11,16

A Baía de Sepetiba (BS) (23º 00' 03" S e 43º 47' 57"O) é um corpo d'água semifechado com 447 km², profundidade média de 6,0 m e com maré variando até 2,0 m.¹⁷ A bacia hidrográfica (2000 km²) é responsável pelo lançamento de aproximadamente 14 milhões de m³ dia^-1 de água doce na baía principalmente através do canal de São Francisco e rios da Guarda, Guandu e Cação.¹⁸

Nas últimas décadas, a BS sofreu um considerável desenvolvimento urbano (1,7 milhões de habitantes) e industrial.^19,20 A bacia de drenagem da BS abriga terminais portuários e cerca de 400 indústrias, sendo a maioria delas metalúrgicas, o que contribui para o lançamento direto de resíduos ricos em metais e outras substâncias potencialmente tóxicas nos rios que abastecem as águas da baía.^21,22 O turismo também se apresenta como outro vetor de alteração antrópica na região, particularmente na porção leste (área interna) da Baía de Sepetiba.¹⁸

A contaminação do sedimento tem sido amplamente estudada na BS, principalmente em relação à concentração de metais e muito pouco em relação aos contaminantes orgânicos.^{18,19,21,23-26} Poucos estudos abordam a influência da matéria orgânica na qualidade dos sedimentos nos últimos anos.^22,27

Estudos espectroscópicos na região do infravermelho para avaliar a matéria orgânica no sedimento da BS são inovadores. Portanto, o objetivo deste estudo foi caracterizar a composição da matéria orgânica nos sedimentos superficiais da Baía de Sepetiba através de análise elementar (carbono e nitrogênio) e molecular através da espectroscopia no infravermelho, avaliando a distribuição espacial destes em relação a granulometria.

PARTE EXPERIMENTAL

Amostragem e tratamento das amostras

A amostragem do sedimento superficial (0 - 10 cm) foi realizada com busca-fundo de aço inox em 19 estações distribuídas em forma de arco ao longo da linha da costa da Baía de Sepetiba, priorizando o aporte da drenagem continental, tanto na área interna (região leste) da baía quanto na externa (região oeste - conexão com o mar) (Figura 1). Todas as amostras foram cuidadosamente transferidas, com espátula de aço inox para recipientes de vidro previamente descontaminados (Mufla - 450 ºC por 4 h). Após a coleta as amostras foram mantidas resfriadas até serem armazenadas no laboratório, sob refrigeração (-20 °C), para posterior processamento das análises granulométricas, da composição elementar (C e N) e da análise espectroscópica da matéria orgânica.

Figura 1. Pontos de amostragem e ocupação no entorno da Baía de Sepetiba-RJ

Determinação da granulometria, carbono orgânico e nitrogênio total

Para a caracterização granulométrica, uma alíquota de 2,5 g de sedimento descarbonatado (HCl 0,1 mol L^-1) e seco (a 40 °C, por 72 h) foram colocadas em um tubo falcon de 50 mL, e adicionados 40 mL de agente dispersante (hidróxido de sódio 40 g L^-1), seguido de agitação por 24 h. As frações granulométricas (grãos finos % < 0,63 μm e grãos grossos % > 0,63 μm) foram determinadas pelo analisador de partículas a laser CILAS Shimadzu 1064 seguindo metodologia descrita na literatura.²⁸ Os resultados foram obtidos com auxílio do programa GRADSTAT versão 8.

As análises dos teores de carbono orgânico (C_org) e nitrogênio total (N_total) foram realizadas no LABCEN-UFSM (Laboratório de Pesquisa em Biotransformações de C e N), a partir de alíquotas de 10 g de sedimento seco (a 40 °C, por 72 h), homogeneizado (gral e pistilo de ágata) e previamente descarbonatados (HCl 0,1 mol L^-1). As amostras foram analisadas em duplicata, utilizando o analisador elementar Flash EA1112 (Thermo Electron Corporation, Milan, Italy) seguindo metodologia descrita na literatura.²⁹ O limite de quantificação (LQ) do método foi de 0,01% w/w tanto para o carbono orgânico quanto para o nitrogênio total, calculado com base no ponto mais baixo da curva de calibração.

Análise espectroscópica

As amostras foram analisadas por espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier com refletância difusa (DRIFT). Previamente à análise, as amostras de sedimentos foram descarbonatadas e tratadas com solução de HF 10% (v/v) para remoção da fração mineral. Uma alíquota de 10 g de sedimento seco (a 40 °C, por 72 h) e descarbonatado (HCl 0,1 mol L^-1) foi colocada em um tubo falcon de 50 mL, e adicionados 30 mL de HF 10%, seguido de agitação mecânica por 2 h, seguindo metodologia descrita na literatura.³⁰ Após centrifugação (4.000 rpm, 10 min) e separação do sobrenadante, o procedimento foi repetido 3 vezes até que o resíduo adquirisse coloração escura. A MO tratada com HF 10% (MO_HF) foi lavada cinco vezes com água deionizada, sendo 5,6 o pH do sobrenadante após a última lavagem. Em seguida, as amostras foram secas em estufa a 40 °C durante 48 h.

Para averiguar se procedência do sinal emitido no infravermelho era de origem orgânica ou mineral (contra prova), selecionou-se duas amostras de MO_HF (BS7 e BS19), as quais foram tratadas com H₂O₂ 30% até a amostra adquirir coloração clara, indicando remoção da MO.

Os espectros do DRIFT das amostras de MO_HF foram obtidos na região espectral de 4000 cm^-1 a 500 cm^-1, com resolução de 4 cm^-1, acúmulo de 32 scans e intensidade do sinal em absorbância, utilizando um Nicolet iS50 FT-IR (Thermo Fisher Scientific Corporation). Os espectros obtidos foram tratados utilizando-se o software Origin (versão 8) (OriginLab Corporation). Os espectros foram ajustados por uma linha de base em 3800, 1750, 980 e 500 cm^-1 como pontos de absorbância zero. Em seguida os dados de intensidade e número de ondas das principais bandas do DRIFT foram identificados. A atribuição das bandas foi feita segundo dados disponíveis na literatura (Tabela 1).^16,31-36

A partir dos dados de intensidade das bandas de absorção (após correção da linha de base), o grau de aromaticidade da MO_HF foi determinado a partir do cálculo do índice de aromaticidade (I_A). O I_A consiste na razão entre a intensidade da absorção em 1650 cm^-1 e em 2925 cm^-1 (aromático/alifáticos), conforme descrito na literatura.^31,37 Esse procedimento para avaliação do grau aromaticidade, ou seja, o grau de saturação/condensação da matéria orgânica é reportado em outros estudos.^33,38,39

Análise estatística

As análises estatísticas dos resultados de teor de finos, carbono orgânico, nitrogênio total e índice de aromaticidade foram realizadas com a utilização do programa STATISTICA 12.1 (Copyright^© 1984-97, StatSoft, Inc.), onde a normalidade dos parâmetros foi testada por meio do teste Shapiro-Wilk. A maioria dos parâmetros não apresentou distribuição normal. Desta forma, empregou-se a correlação não paramétrica de Spearman, que opera com ranking das medidas para cada variável.⁴⁰ Foram consideradas significativas as correlações e os testes cujo p < 0,05.

RESULTADOS

A distribuição granulométrica dos sedimentos superficiais da Baía de Sepetiba apresentou heterogeneidade espacial marcante entre as áreas interna (BS1 até BS7) e externa (BS8 até BS19). Os maiores teores de grãos finos (<0,63 μm) foram encontrados nas estações da área interna (0,88-26,09%), enquanto os menores teores foram encontrados nas estações da área externa (1,93-16,63%) (Tabela 2).

As concentrações de carbono orgânico (0,20-3,45%) seguiram o padrão de distribuição dos sedimentos finos (Tabela 2). As maiores concentrações de C_org (>1,5%) foram encontradas nas estações BS1, BS2, BS3, BS6, BS11 e BS18, todas com elevado teor de finos. Entretanto, teores de C_org (<0,5%) significativamente menores foram encontrados nas estações BS10, BS13, BS15, BS16, BS17. As concentrações de nitrogênio total (<LQ-0,36%) também variaram de acordo com a distribuição dos sedimentos finos (Tabela 2). As maiores concentrações de N_total foram observadas nas estações BS1, BS2, BS3, BS6 e BS11, todas com elevador teor de finos. Em contrapartida, as demais estações apresentaram concentrações abaixo da média de N_total. Ademais, o teor de finos e as concentrações de carbono orgânico e nitrogênio total apresentaram correlações positivas (r=0,89; p<0,05); um comportamento geoquímico clássico.

A razão molar C/N para os sedimentos superficiais foi relativamente homogênea entre as áreas interna e externa da Baía de Sepetiba, variando, de forma geral, entre 10 e 20 (Tabela 2). Apenas as estações BS1, BS2 e BS8 apresentaram razão C/N < 10. Por outro lado, as estações BS6, BS7, BS14, BS18 e BS19 apresentaram uma razão C/N ≥ 20.

As amostras do DRIFT apresentaram o mesmo padrão de espectro (Figura 2). Apenas as estações BS1 e BS2 apresentaram comportamento espectral distinto do resto do grupo. Na região entre 3600-3610 cm^-1 foi identificado um ombro que pode ser atribuído aos estiramentos O-H e Al-OH de silicatos. Já na região entre 3400-3280 cm^-1 a banda larga é atribuída ao estiramento da ligação O-H e N-H em interação com grupos fenólicos, alcoólicos, carboxílicos e amida.¹⁶ As bandas 2925 e 2850 cm^-1 são atribuídas aos estiramento das ligações C-H em grupos alifáticos.^16,31

Figura 2. Espectro do DRIFT da MO_HF para as estações da área interna (a), e da área externa (b) da Baía de Sepetiba, mostrando as bandas de absorção características dos grupos funcionais orgânicos e minerais

A área entre 1800 cm^-1 e 900 cm^-1, corresponde à região denominada "impressão digital da MO" (finger print).^16,31 Nos espectros das estações BS1 e BS2 observou-se intensas bandas sobrepostas nesta área (1800-900 cm^-1). A banda entre 1700-1720 cm^-1 pode ser atribuída às vibrações de estiramento das ligações C=O em grupos carboxílicos.³² A banda intensa, em 1650 cm^-1, pode ser atribuída às vibrações de estiramento das ligações C=C presente em compostos aromáticos,³³ e absorções na faixa de 1560-1548 cm^-1 podem ser atribuídas às vibrações de estiramento simétrico das ligações C=N em amida-II (1560 cm^-1).³⁴

A banda de absorção em 1375 cm^-1 pode ser associada às vibrações de estiramento da ligação C-O e deformação da ligação O-H em grupos fenóis (1380-1360 cm^-1).³⁵ Absorções na faixa de 1170-568 cm^-1 podem ser atribuídas ao estiramento das ligações C-O, -COH e C-O-C em carboidratos (1050 cm^-1) e estiramento das ligações Al-O-Si, Si-O-Si e Si-O em minerais de argila e quartzo (entre 1170 e 568 cm^-1).³⁶

A faixa de absorção intensa em torno de 650 cm^-1 é provavelmente atribuída à absorção de minerais recém-formados (CaF₂), durante o tratamento com HF 10%, para isolar a MO e/ou minerais residuais.^41,42 A alta intensidade desta banda atesta a presença de uma quantidade significativa de minerais neoformados e/ou residuais durante a desmineralização.¹⁶

Nos espectros das amostras BS7 e BS19, após tratamento com peróxido de hidrogênio, as bandas da região em torno de 3400 cm^-1 e entre 1750 e 1400 cm^-1 diminuíram drasticamente ou, até mesmo, desapareceram, confirmando que as atribuições feitas nessa região espectral pertencem a grupos orgânicos (Figura 3). As bandas na faixa apresentadas entre 1170-568 cm^-1 podem ser atribuídas às frações minerais remanescentes que, após a eliminação da MO, se intensificaram.

Figura 3. Espectro do DRIFT da MO_HF das amostras BS7 e BS19 (a) e das amostras posteriormente tratadas com H₂O₂ (b)

O índice de aromaticidade (I_A) variou entre 2,01 e 18,73 (Tabela 2). As amostras de sedimento superficial com menor grau de aromaticidade (<3,00) foram encontradas nas estações da área interna, as estações BS1, BS2, BS3 e BS6. Por outro lado, os sedimentos das estações da área externa apresentaram alto grau de aromaticidade (>7,00). Os valores de I_A se correlacionaram positivamente com C/N (r=0,42; p<0,10).

DISCUSSÃO

A distribuição granulométrica dos sedimentos superficiais da BS é resultado das correntes horárias e da distância da entrada da baía, onde a ação das correntes de maré e das ondas são mais intensas.^43,44 Desta forma, os sedimentos da área externa apresentam granulometria arenosa e baixas concentrações de carbono e nitrogênio. Por outro lado, a medida em que ocorre a redução da ação hidrodinâmica em direção a parte interna da baía, os teores de sedimentos finos e a concentração de matéria biogênica tendem a aumentar. A matéria orgânica sedimentar está fortemente relacionada ao conteúdo de grãos finos (<0,63 mm).⁴⁵ Além disso, existe a presença de extensos manguezais nesta região, considerados como fontes significativas de matéria orgânica.⁴⁶ Os resultados encontrados no presente estudo apresentam a mesma variação de concentração e distribuição espacial de granulometria e carbono orgânico observado anteriormente na Baía de Sepetiba.²⁰

A concentração de C_org (0,20-3,45%) na BS é relativamente baixa quando comparada a teores de carbono orgânico em sedimentos lamosos de sistemas costeiros altamente degradados como a Baía de Guanabara, no Rio de Janeiro (0,03-5,15%) ou a Baía de Santos, em São Paulo (0,09-5,78%).^47,48 O menor teor de carbono orgânico na Baía de Sepetiba pode ser atribuído à predominância de sedimentos arenosos. Contudo, a variação da concentração de carbono observada nos estudos de Figueiredo et al.¹⁹ (2008) (0,40-1,84%), Carreira et al.¹⁸ (2009) (0,66-2,62%), Ribeiro et al.²⁰ (2013) (2,00-3,00%) e no presente estudo indicam um aumento no teor de matéria orgânica na Baía de Sepetiba. Provavelmente, as contribuições significativas das cargas orgânicas provenientes dos manguezais e do aporte fluvial, devem ser as responsáveis pelo contínuo enriquecimento de MO nos sedimentos. O Rio Guandu e o canal do São Francisco contribuem com 96% do material particulado que entra na baía e podem representar uma fonte significativa de material orgânico derivado de solos continentais e da vegetação terrestre, além disso, as florestas de manguezais podem produzir um enriquecimento localizado de matéria orgânica dissolvida.⁴⁹

A alta correlação entre C_org e N_total é um indício de que as fontes de matéria orgânica estão presentes em proporções constantes ao longo das estações estudadas.⁵⁰ Considerando a eficiência da hidrodinâmica local em transportar os sedimentos finos de uma área para outra, a proporção entre carbono e nitrogênio pode ser atribuída a uma eficiente mistura entre fontes terrestre e marinha antes da deposição final.⁵¹

A razão C/N obtida para a maioria dos sedimentos superficiais analisados indicam que a matéria orgânica presente no sedimento pode ser uma mistura entre material autóctone e alóctone (10 < C/N < 20).⁵² Como já indicado acima, a hidrodinâmica apresenta eficiência na mistura de materiais de diversas fontes. As estações BS6 e BS18 apresentaram razão C/N indicativas de insumos alóctones elevados (C:N ≥ 20).^53,54 Segundo Carreira et al. (2009) a principal fonte de matéria orgânica para Baía de Sepetiba é de origem alóctone (florestas de manguezais). Apenas as estações BS1, BS2 e BS8 apresentaram razão C/N com predominância de matéria orgânica de origem autóctone (fitoplâncton; C:N < 10).⁵³ Contudo, considerando que essas estações estão próximas a foz de rios contaminados por efluentes domésticos,⁵⁵ a adsorção de nitrogênio inorgânico dissolvido, principalmente amônia, às partículas finas podem estar mascarando a razão C/N.⁵⁶

Os espectros do DRIFT para a MO_HF são similares aos espectros de matéria orgânica em sedimentos costeiros reportados na literatura.^2,10,11,16 A razão C/N sugere que a composição molecular da MO_HF é derivada da mistura de materiais provenientes de fontes terrestre e marinha. A realização da contraprova determinou que as bandas de absorção presentes na faixa do 3600-1360 cm^-1 são provenientes das ligações de grupos funcionais orgânicos, uma vez que estes desapareceram após a remoção da MO com H₂O₂.

A presença de ligações de grupos carboxílicos pode sugerir a ocorrência do processo de carboxilação durante a degradação de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPA) por bactérias no sedimento.⁵⁷ Estudos prévios identificaram compostos aromáticos em sedimentos da Baía de Sepetiba.²³ A presença de fortes bandas de absorção em ligações de grupos carboxílico, e bandas menos proeminentes na faixa do 1610-1620 cm^-1 (ligações do tipo C=C e COO-) sugerem a presença de uma matéria orgânica de origem vascular altamente processada,⁵⁸ reafirmando a contribuição das florestas de manguezais como principais fontes de MO para BS. A presença de bandas de absorção entre 2925-2850 cm^-1 podem se referir aos grupos metil (-CH₃) e metileno (-CH₂) que são característicos de material húmico.³² As substâncias húmicas são os materiais orgânicos mais difundidos e ubíquos em ambientes aquáticos e terrestres.⁵⁹ Por fim, a presença de bandas de grupos carbóxilos e alifáticos, assim como ligações de compostos nitrogenados, sugerem a presença de detritos de algas verdes.⁶⁰

O I_A obtido sugere que a matéria orgânica sedimentar da área interna da BS apresenta valores de aromaticidade menores quando comparados a área externa. Os resultados dos espectros corroboram esse padrão, pois na área interna a intensidade do sinal de compostos alifáticos (C-H) foi maior do que o encontrado na área externa. Este comportamento oposto pode estar relacionado a degradação (química e biológica) dos compostos alifáticos presentes na MO da área externa, diminuindo assim, a intensidade do sinal de alifáticos nesta região.³¹

A hidrodinâmica e o aporte fluvial de MO também são peças fundamentais para a distinção nos valores de aromaticidade entre as áreas interna e externa da BS. A circulação e a renovação da água são mais intensas na área externa e,^43,44 portanto, favorecem a degradação química (oxidação) e biológica (processos aeróbios são mais eficientes que os anaeróbios) de compostos mais simples (C-H), ou carreamento da MO.⁴⁷ Por outro lado, a circulação na área interna é menos intensa e favorece o acúmulo e a preservação de MO drenada para BS, contribuindo provavelmente para o incremento de compostos alifáticos. A MO acumulada nesta região apresenta uma variedade de compostos orgânicos, como mostram os espectros (Figura 2), e este acúmulo implicaria na redução das condições óxicas, retardando a degradação biológica.

A correlação positiva entre o I_A e a razão C/N é um indício de que a aromaticidade aumenta quando a razão elementar indica origem terrestre, ou seja, maior grau de recalcitrância quando comparado com a origem marinha.⁵³ Desta forma, o índice de aromaticidade pode ser uma ferramenta útil para o estudo de matéria orgânica sedimentar indicando o seu grau de recalcitrância.

As atividades portuárias e uma série de insumos urbanos, industriais e atmosféricos são fontes de compostos aromáticos para a zona costeira, cuja presença de compostos de origem petrogênica e pirolítica e risco ambiental, já foram confirmadas por trabalhos pretéritos na Baía de Sepetiba.^19,23 Mais ainda, as menores concentrações de compostos alifáticos em relação a aromáticos na Baía de Sepetiba também foram descritas na literatura.²³

CONCLUSÃO

A composição granulométrica dos sedimentos superficiais da Baía de Sepetiba é resultado das condições hidrodinâmicas locais que favorecem a dispersão dos sedimentos finos na área externa e o acúmulo deste material na área interna do estuário. Em função da distribuição de sedimentos finos, as maiores concentrações de carbono e nitrogênio foram encontradas na área interna, e as menores concentrações na área externa da Baía de Sepetiba. A hidrodinâmica também parece ser responsável por manter as proporções constantes de C_org e N_total ao longo das estações de coleta.

As concentrações de carbono orgânico encontradas no sedimento superficial da BS, ainda que sejam inferiores quando comparadas aos teores encontrados em sistemas costeiros degradados, indicam que o acúmulo de C_org tem aumentado nos últimos anos. As razões C/N indicam que a principal contribuição de matéria orgânica no sedimento da BS é uma mistura de origem autóctone e alóctone.

Os espectros do DRIFT fornecem informações importantes a respeito da estrutura molecular (grupos funcionais orgânicos e minerais), composição e transformações da matéria orgânica, além de ser uma técnica mais rápida e menos onerosa quando comparada com as análises cromatográficas. A matéria orgânica dos sedimentos superficiais apresentou um alto grau de aromaticidade na área externa em comparação com a área interna, possivelmente em decorrência do intenso processo de degradação dessa área que resulta no decréscimo nos níveis de alifáticos. A correlação significativa entre a razão C/N e o I_A endossa o DRIFT como uma ferramenta útil e confiável para a análise preliminar do grau de aromaticidade/recalcitrância da matéria orgânica sedimentar.

AGRADECIMENTOS

A Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) pelo suporte financeiro e pela concessão de bolsas de pesquisa (doutorado e mestrado) para A. Carvalho; L. Silva; V. Moreira; M. Vicente e A. Andrade.

REFERÊNCIAS

1. Moros, J.; Cassella, R. J.; Barciela-Alonso, M. C.; Vib. Spectrosc. 2010, 53, 204.

2. Oudghiri, F.; García-Morales J. L.; Rodríguez-Barroso, M. R.; Water, Air, Soil Pollut. 2014, 225, 1.

3. Sterckeman, T.; Douay, F.; Baize, D.; Fourrier, H.; Proix, N.; Schvartz, C.; Geoderma 2006, 136, 912.

4. Li, X.; Wai, O. W. H.; Li, Y. S.; Coles, B. J.; Ramsey, M. H.; Thornton, I.; Appl. Geochem. 2000, 15, 567.

5. Turner A.; Estuarine, Coastal Shelf Sci. 2000, 50, 355.

6. Moros, J.; Barciela-Alonso, M. C.; Pazos-Capeáns, P.; Anal. Chim. Acta 2008, 624, 113.

7. Poulenard, J.; Perrette, Y.; Fanget, B.; Quetin, P.; Trevisan, D.; Dorioz, J. M.; Sci. Total Environ. 2009, 407, 2808.

8. Janik, L. J.; Skjemstad, J. O.; Shepherd, K. D.; Spouncer, L. R.; Aust. J. Soil Res. 2007, 45, 73.

9. Viscarra-Rossel, R. A.; Walvoort, D. J. J.; McBratney, A. B.; Janik, L. J.; Skjemstad, J. O.; Geoderma 2006, 131, 59.

10. Ibrahim, M.; Hameed, A. J.; Jalbout, A.; Appl. Spectrosc. 2008, 62, 306.

11. Abdel-Gawad, F. K.; Ibrahim, H. S.; Ammar, N. S.; Ibrahim, M.; Spectrochim. Acta, Part A 2012, 97, 771.

12. Veerasingam, S.; Venkatachalapathy, R.; Infrared Phys. Technol. 2014, 66, 136.

13. Viscarra-Rossel, R. A.; McBratney, A. B.; Jeon, Y. S.; Odeh, I. O. A.; Aust. J. Soil Res. 2008, 46, 1.

14. Calderón, F. J.; Reeves, J. B.; Collins, H. P.; Paul, E. A.; Soil Sci. Soc. Am. J. 2011, 75, 568.

15. Tatzber, M.; Mutsch, F.; Mentler, A.; Geoderma 2011, 166, 162.

16. Hatcher, P. G.; Ravin, A.; Behar, F.; Baudin, F.; Org. Geochem. 2014, 75, 8.

17. Lacerda, L. D.; Gonçalves, G. O.; Mar. Chem. 2001, 76, 47.

18. Carreira, R. S.; Ribeiro, P. V.; Silva, C. E. M.; Farias, C. O.; Quim. Nova 2009, 32, 1805.

19. Figueiredo, L. H. M.; Wagener, A. D. L. R.; Dagautc, J.; Saliot, A.; J. Braz. Chem. Soc. 2008, 19, 516.

20. Ribeiro, A. P.; Figueiredo, A. M. G.; Santos, J. O.; Mar. Pollut. Bull. 2013, 68, 55.

21. Paraquetti, H. H. M.; Lacerda, L. D.; Almeida, M. D.; Marins, R. V.; Mounierc, S.; J. Braz. Chem. Soc. 2007, 18, 1259.

22. Rezende, C. E.; Lacerda, L. D.; Ovalle, A. R. C.; Silva, L. F. F.; Braz. J. Biol. 2007, 67, 673.

23. Mounier, S.; Lacerda, L. D.; Marins, R. V.; Bemaim, J.; Bull. Environ. Contam. Toxicol. 2001, 67, 519.

24. Lacerda, L. D.; Marins, R. V.; Paraquetti, H. H. M.; Mounier, S.; Benaim, J.; Fevrier, D.; J. Braz. Chem. Soc. 2001, 12, 93.

25. Lacerda, L.; Molisani, M.; Mar. Pollut. Bull. 2006, 52, 969.

26. Pinheiro, P. P. O.; Massone, C. G.; Carreira, R. S.; Mar. Pollut. Bull. 2017, 120, 6.

27. Xavier, L.; Mounier, S.; Paraquetti, H. H. M.; Mar. Environ. Res. 2008, 65, 148.

28. Hedges, J. I.; Stern, J. H.; Limnol. Oceanogr. 1984, 29, 657.

29. EMBRAPA; Manual de Métodos de Análise de Solo, 1^a ed.; EMBRAPA-SNLCS: Rio de Janeiro, 1997.

30. Gonçalves, C. N.; Dalmolin, R. S. D.; Dick, D. P.; Knicker, H.; Klamt, E.; Kögel-Knabner, I.; Geoderma 2003, 116, 373.

31. Chefetz, B.; Hatcher, P. G.; Hadar, Y.; Chen, Y.; J. Environ. Qual. 1996, 25, 776.

32. Stevenson, F. J.; Humus Chemistry. Genesis, Composition, Reactions, 2^nd ed.; Wiley: New York, 1994.

33. Inbar, Y.; Chen, Y.; Hadar, Y.; Soil Sci. Soc. Am. J. 1989, 53, 1695.

34. Haberhauer, G.; Gerzabek, M. H.; Vib. Spectrosc. 1999, 19, 413.

35. Bornemann, L.; Welp, G.; Amelung, W.; Soil Sci. Soc. Am. J. 2010, 74, 1147.

36. Pirie, A.; Singh, B.; Islam, K.; Aust. J. Soil Res. 2005, 43, 713.

37. Dick, D. P.; Knicker, H.; Ávila, L. G.; Inda, A. V.; Giasson, E.; Bissani, C. A.; Org. Geochem. 2006, 37, 1537.

38. Dick, D. P.; Silva, L. D.; Inda, A. V.; Knicker, H.; Rev. Bras. Cienc. Solo 2008, 32, 2289.

39. Dick, D. P.; Gomes, J.; Bayer, C.; Bodmann, B.; Rev. Bras. Cienc. Solo 2000, 24, 285.

40. Zar, J. H.; Biostatistical Analysis, 2^nd ed.; Prentice-Hall Inc.: New Jersey, 1982.

41. Garcette-Lepecq, A.; Derenne, S.; Largeau, C.; Bouloubassi, I.; Saliot, A.; Org. Geochem. 2000, 31, 1663.

42. Riboulleau, A.; Derenne, S.; Sarret, G.; Largeau, C.; Baudin, F.; Connan, J.; Org. Geochem. 2000, 31, 1641.

43. Signorini, S. R.; Brazilian Journal of Oceanography 1980, 29, 57.

44. Molisani, M. M.; Kjerfve, B.; Silva, A. P.; Lacerda, L. D.; J. Hydrol. 2006, 331, 425.

45. Burdige, D. J.; Chem. Rev. (Washington, DC, U. S.) 2007, 107, 467.

46. Neves, L. M.; Pereira, H. H.; Costa, M. R.; Araújo, F. G.; Revista Brasileira de Zoologia 2006, 23, 421.

47. Sabadini-Santos, E.; Silva, T. S.; Lopes-Rosa, T. D.; Mendonça-Filho, J. G.; Santelli, R. E.; Crapez, M. A. C.; Water, Air, Soil Pollut. 2014, 225, 1949.

48. Siqueira, G. W.; Braga, E. S.; Mahíques, M.; Aprile, F.; Arq. Cienc. Mar. 2006, 39, 18.

49. Rezende, C. E.; Pfeiffer, W. C.; Martinelli, L. A.; Tsamakis, E.; Hedges, J. I.; Keil R. G.; Estuarine, Coastal Shelf Sci. 2010, 87, 479.

50. Ruttenberg, K. C.; Goñi, M. A.; Mar. Geol. 1997, 139, 123.

51. Sabadini-Santos, E.; Jennerjahn, T.; Medeiros, P. R. P.; Souza, W. F. L.; Knoppers, B. A.; Geochim. Bras. 2013, 27, 37.

52. Stein, R. Em: Lecture Notes in Earth Sciences, 1^st ed.; Springer-Verlag: Berlin, 1991.

53. Meyers, P. A.; Chem. Geol. 1994, 114, 289.

54. Bordovskiy, O. K.; Mar. Geol. 1965, 3, 33.

55. Coimbra, A.; Dissertação de Mestrado, Universidade Federal Fluminense, Brasil, 2003.

56. Hedges, J. I.; Clark, W. A.; Quay, P. D.; Richey, J. E.; Devol, A. H.; Santos, M.; Limnol. Oceanogr. 1986, 31, 717.

57. Schmitt, J.; Nivens, D.; White, D. C.; Flemming, H. C.; Water Sci. Technol. 1995, 32, 149.

58. Baes, A. U.; Bloom, P. R.; Soil Sci. Soc. Am. J. 1989, 53, 695.

59. Parlanti, E.; Sierra, M. M. D.; Giovanela, M.; Soriano-Sierra, E. J.; Geochem. J. 2011, 38, 255.

60. Lartiges, B. S.; Deneux-Mustin, S.; Villemin, G.; Water Res. 2001, 35, 808.